RCA滚环扩增试剂盒

   (Rolling Circle Amplification Kit)

   Cat. No.: A3702    Size: 100T

产品描述：滚环扩增（rolling circle amplification，RCA）是新近发展起来的一种恒温核酸扩增方法。以环状DNA为模板，通过一个短的DNA引物（与部分环状模板互补），在phi29 DNA聚合酶催化下将dNTPs转变成单链DNA，此单链DNA包含成百上千个重复的模板互补片段。这种方法不仅可以直接扩增DNA和RNA，还可以实现对靶核酸的信号放大，灵敏度达到一个拷贝的核酸分子，因此在核酸检测中具有很大的应用价值和潜力。本试剂盒配置的phi29 DNA聚合酶具有链置换和连续合成特性，可连续合成长达70kb的DNA片段。另外，该酶具有3’→5’外切酶校读功能，合成的DNA片段保真性高。

试剂盒配备的Random Hexamers为6碱基随机引物可对目标分子进行指数放大（通常放大10000倍）。

 RCA滚环扩增试剂盒

组分：

操作方法：

1. 配置反应液

10×phi29 Buffer              2.5 μl  

10mM dNTP Mixture             2 μl  

25XRandom Hexamers             1 μl  

模板DNA                   0.01-20ng

ddH2O                     up to 25μl  

2. 变性退火:将上述产物置于PCR上，93°C变性3 min，25°C 5min。

3. 向上述退火产物中加0.5 μl phi29 DNA Polymerase和0.2 μl Yeast Pyrophosphatase，    混合均匀后放置到30°C反应2~16h（根据所需的产物量进行反应时间调整，通常分别在2h、5h、16h进行电泳确认）。

4. 反应结束后65°C 10 min进行失活反应。

注意：RCA 扩增还可应用于其它缺刻或诊断相应的实验，此时Random Hexamer为非必须品。

 RCA滚环扩增试剂盒

储存：-20℃可保存 3 年。

本产品仅供科研使用，请勿用于人体及动物的治疗、临床诊断等用途。RCA滚环扩增试剂盒