辅酶Q10(CoQ10)检测试剂盒(微板法)产品简介：
辅酶Q(Coenzyme Q，CoQ)是一种生物体内广泛存在的脂溶性醌类化合物，故又称泛醌，在体内呼吸链中质子移位及电子传递中起重要作用，是呼吸链中重要的递氢体，它是细胞呼吸和细胞代谢的激活剂，也是重要的抗氧化剂和非特异性免疫增强剂。对多种酶有激活作用。不同生物体来源的辅酶Q其侧链异戊烯单位的数目不同，人类和哺乳动物是10个异戊烯单位，故称辅酶Q10。辅酶Q10是辅酶Q类的重要成员之一，它们与线粒体内膜相结合，广泛参与体内的生物代谢过程。
辅酶Q10不仅能给心脏提供动力，还具有卓越的抗氧化，清除自由基功能，能预防血管壁脂质过氧化，预防动脉粥样硬化，并且无任何毒副作用。具体作用体现在以下四个方面：
①帮助保护心脏辅酶Q10有助于为心肌提供充足氧气，预防突发性心脏病，尤其在心肌缺氧过程中辅酶Q10发挥关键性改善作用。
②保护皮肤长期使用辅酶Q10能够有效防止皮肤衰老，减少脸部皱纹。
③抗疲劳辅酶Q10使细胞保持良好健康的状态，因而机体充满活力，精力旺盛，脑力充沛。它是细胞自身产生的天然抗氧化剂和细胞代谢启动剂，具有保护和恢复生物膜结构的完整性、稳定膜电位作用，是机体的非特异性免疫增强剂，因此显示出极好抗疲劳作用。
④防癌抗癌研究表明，辅酶Q10有抗肿瘤作用，临床对于晚期转移性癌症有一定疗效。
Leagene辅酶Q10(CoQ10)检测试剂盒(微板法)其检测原理是待测样品在碱性条件下，EC取代了CoQ10上的甲氰基，形成蓝色化合物，通过酶标仪测定620nm处吸光度值，根据标准曲线即可测出辅酶Q10的含量。本产品可用于测定花生、牛肉、沙丁鱼、保健品等食品中的CoQ10的含量。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成：
编号 名称 | TE1010 100T | Storage |
试剂(A): CoQ10标准(5mg/ml) | 0.1ml | -20℃ 避光 |
试剂(B): EC solution | 5ml | RT 避光 |
试剂(C): EC buffer | 25ml | RT |
试剂(D): CoQ10 Assay buffer | 5ml | RT |
使用说明书 | 1份 |
自备材料： 1、蒸馏水
2、实验材料：植物组织(大豆、绿豆、玉米等叶片)、血液、组织样本等
3、研钵或匀浆器
4、离心管或试管
5、低温离心机
6、恒温箱或水浴锅
7、分光光度计、比色杯 编号 名称 TO1123 50T Storage 试剂(A): NO2-标准(1mM) 1ml 4℃ 试剂(B): O2- Lysis buffer 125ml 4℃ 试剂(C): 羟胺溶液 30ml 4℃ 试剂(D): 氨基苯磺酸显色液 30ml 4℃ 避光 试剂(E): 萘胺显色液 30ml 4℃ 避光 使用说明书 1 份
辅酶Q10(CoQ10)检测试剂盒(微板法)操作步骤(仅供参考)：
1、准备样品： ①植物样品：取正常或逆境下的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取 1~1.5g， 加入 2ml 预冷的 O2- Lysis buffer 后冰浴条件下匀浆或研磨，4℃ 10000g 离心 10min， 上清液即为超氧阴离子自由基提取液，4℃保存备用。 ②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测 定，4℃保存，用于超氧阴离子自由基的检测。 ③高活性样品：如果样品中含有较高浓度的超氧阴离子自由基，可以使用 O2- Lysis buffer 进行恰当的稀释。
2、配制系列 NO2-标准溶液：取出 NO2-标准(1mM)恢复至室温后，以 NO2-标准(1mM) 按下表继续稀释：
3、O2-加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意 避免产生气泡。如果样品中的超氧阴离子自由基浓度过高，可以减少样品用量或适当稀 释后再进行测定，样品的检测最好能设置平行管。
4、O2-测定：以空白调零，比色杯光径 1cm，分光光度计测定标准管、测定管 530nm 处 吸光度(即为 A 标准、A 测定)。
计算： 以系列 NO2-标准(1~6 号)含量(μM)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，制作标准曲 加入物(ml) 1 2 3 4 5 6 NO2-标准(1mM) 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 蒸馏水 0.99 0.98 0.97 0.96 0.95 0.94 NO2-含量(μM) 10 20 30 40 50 60 加入物(ml) 空白管 标准管 测定管 蒸馏水 1 — — 系列 NO2-标准(1~6 号) — 1 — 待测样品 — — 0.25 O2- Lysis buffer — — 0.25 羟胺溶液 — — 0.5 混匀，25℃水浴孵育 20min。 氨基苯磺酸显色液 0.5 0.5 0.5 萘胺显色液 0.5 0.5 0.5 混匀，30℃水浴孵育 30min。根据测定管的吸光度进而计算 NO 2-含量。
根据如下公式计算具体样品中超氧阴离子自 由基(O2-)的含量： 植物组织样品 O2-(μM/g)=2×n×VT/(W×VS) 血清、尿液等样品 O2-(μM/ml)=2×n×N/VS 超氧阴离子的产生速率的定义：每分钟每克鲜重组织产生的超氧阴离子的物质的量，计 算公式如下： 超氧阴离子产生速率【μmol/(min*g)】=2×n×VT/(W×t×VS) 测得样品中蛋白质含量后，可用下面公式表示： 超氧阴离子产生速率【μmol/(min*mg)】=2×n×VT/(m×t×VS) 式中：2=NO2-与 O2-间的化学计量数 n=从标准曲线上查得的 NO2-含量(μM) VT=超氧阴离子自由基提取液总体积(ml) N=样品稀释倍数 W=样品鲜重(g) m=样品中蛋白质含量(mg) t=样品与羟胺的反应时间(min)=20 VS=测定时加入提取液体积(ml)
注意事项：
1、 实验材料应尽量新鲜，如取材后不立即使用，应存于 4℃。
2、 如果样品中含有较多的叶绿素，会干扰测定结果，可在加入羟胺溶液 25℃水浴孵育 20min 后用等体积乙醚或三氯甲烷萃取叶绿素，再行显色反应。
3、 如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，但应考虑酶标仪的最大检测体积。
4、 所测样本的浓度过高，应用 O2- Lysis buffer 稀释样品后重新测定。
5、 氨基苯磺酸显色液和萘胺显色液有强烈的刺激性，尽量在通风条件好的地方操作，用后 需拧紧瓶盖，避免挥发。
有效期：6 个月有效。4℃运输，4℃保存。
辅酶Q10(CoQ10)检测试剂盒(微板法)相关产品： 附：参考标准曲线范围： Leagene 测定 NO2-标准 10、20、40、60、80、100、120、140、160、180、200μM 在 530nm 的吸光度，据此做出其标准曲线如下： 根据结果可以看出 NO2-标准在 160μM 以上时，OD 值会有偏差，因此样品的 O2-应小于 320μM
